L'epidemie recenti di e malatie di l'alimentu è e novi stime nantu à e malatie di e malatie alimentarii da u Centru per u Controlu è a Prevenzione di e Malatie o CDC puderanu esse l'impetu chì hà spurtatu u passaghju recente di u prugettu di sicurezza alimentare S.510. Comu parte di quella legislazione, a FDA serà tenuta à creà novi rigulamenti di sicurezza di prudutti per i pruduttori di frutti è ligumi di più risicu. Stu sensu elevatu d'urgenza per l'alimentazione sicura hà chì i pruduttori di l'alimentariu è i prucessori rivalutà e so opzioni per pruvà l'alimentu à a fonte o in u campu.
TECNOLOGIE DI TESTING ESISTENTI
I pruduttori è i prucessori anu utilizatu storicamente unu di i trè metudi per pruvà i batteri: sistemi di monitoraghju di a pulizia di adenosina trifosfatu (ATP), teste di cultura è teste di reazione in catena di polimerasi (PCR).
I sistemi di monitoraghju di a pulizia di l'adenosina trifosfatu teste per a molécula ATP, chì si trova in tutti i materiali organici. L'analisi di l'ATP misuranu l'ATP da e cellule animali è vegetali, è ancu da batteri viventi o morti, levitu o muffa. Stu esame pò esse usatu nantu à superfici non organiche per determinà a pulizia è esige chì ci sia da 10,000 100,000 à XNUMX XNUMX battìri prisenti per pruduce abbastanza ATP per risultatu in una deteczione positiva di bacteria.
Un esame di cultura hè una prova di laboratoriu chì determina quale bacteria o levitu pò esse prisenti in una mostra determinata. L'analisi di cultura necessitanu chì a mostra sia incubata per un tempu stabilitu, tipicamente da 24 à 48 ore, per dà a bacteria a chance di cultivà per determinà a so presenza. Questu hè bisognu di mandà a mostra à un laboratoriu.
A PCR hè un test chì usa DNA per pruvà diversi batteri è patogeni. U prucessu amplifica un pezzu di DNA chì genera migliaia à milioni di copie. Hè assai precisu è dura trà 12 ore è 26 ore.
PROBLEMI INHERENT
E tecnulugii esistenti anu svantaghji chì li rendenu inefficaci per i scopi di i pruduttori di l'alimentu è e teste inefficaci ponu risultatu in a contaminazione di l'alimentariu, a malatia, a perdita di rivenuti è assai di più.
Test ATP per a presenza di a molécula ATP, chì hè presente in tuttu u materiale urganicu. Questu significa chì un test ATP pusitivu cunfirma solu chì a materia urganica hè presente - micca necessariamente bacteria. Questa prova hè in realtà una prova per a pulizia, o chì una superficia hè libera di qualsiasi materiale urganicu vivu o mortu. Perchè teste per a materia urganica, ùn pò micca esse aduprata nantu à l'alimentariu postu chì l'alimentariu hè organicu. Inoltre, l'analisi ATP ùn pò micca detectà u biofilm, chì hè un subproduttu appiccicosu di l'organisimi chì ponu ammuccià i batteri vivi. Un altru prublema cù a prova ATP hè di pruduce abbastanza ATP per creà un test pusitivu, i battìri averebbe bisognu di numeru almenu 10,000 XNUMX bacteria.
L'assai di cultura in generale sò abbastanza precisi, ma u metudu esige chì i battìri sò incubati da 24 ore à 48 ore per verificà a presenza di bacteria. Questu significa chì a mostra hè mandata à un laboratoriu per questu tempu di incubazione è un tecnicu furmatu leghje a prova. A necessità di u travagliu di labburatoriu aumenta u costu per l'utilizatori finali è u tempu aghjuntu aumenta e probabilità di l'alimentu contaminatu sfilà in u prucessu.
L'assai PCR, ancu assai precisi, esigenu chì u pruduttore trasmette a mostra à un laboratoriu induve un tecnicu furmatu usa un equipamentu caru per processà a prova. A prova stessu hè custituita da parechji passi cumplicati, chì aghjunghjenu i costi passati à u pruduttore di l'alimentariu. L'analisi PCR necessitanu una fase di arricchimentu chì dura trà 8 ore è 20 ore, più da 1 ora à 4 ore per a prova vera. I passi aghjunti è u tempu aumentanu i costi è e probabilità di a contaminazione di l'alimentariu passanu inosservata.
PROVA ENZIME
I microbiologi anu studiatu è aduprendu enzimi per a deteczione di i batteri da u principiu di l'anni 1950. Parechje anu cessatu di utilizà metudi enzimatici è anu cambiatu à l'antigene / anticorpi o tecnulugii di Test di Amplificazione di l'Acidu Nucleicu (NAAT) in l'anni 1970 è 1980. Da quellu tempu, però, a ricerca enzimatica cuntinuata hà purtatu à a scuperta di enzimi bacteriali specifichi assuciati cù parechji microorganismi diffirenti. Questa informazione hà purtatu à u sviluppu di sustrati proprietarii chì ponu identificà è ligà à enzimi specifichi emessi da batteri specifichi. Cù sta nova informazione sò stati sviluppati testi per utilizà i sustrati proprietarii chì, quandu sò idrolizzati da un enzima, producenu una fluorescenza chì pò esse leghje da un fluorometru o aghjunghjendu un reattivu per pruduce una reazione colormetrica.
L'altri sistemi di diagnostichi anu da truvà a cellula bacteriana stessu crescendu u campione in culture, o riplicà l'ADN utilizendu un sistema PCR/NAAT. Questi metudi pigghianu, in a maiò parte di i casi, più di un ghjornu per ottene risultati da u tempu di raccolta di campioni è necessitanu tecnichi di laboratori furmati è equipaggiu caru. Utilizendu una metodulugia di rilevazione di l'enzyme, i battìri ponu esse pruducia millaie di molécule di un enzima, chì aumenta a probabilità è u tempu di esse rilevatu à un ritmu assai più veloce cà qualsiasi altri metudi di rilevazione.
KITS DI DETECTION D'ENZIME BATTERIALI
Utilizendu sta metodulugia, i kits di rilevazione di l'enzimi batterichi, chì venenu in kit di tamponi manuali o kit di fluorometru digitale portatili, ponu esse aduprati in u campu per pruvà superfici è alimenti per organismi totali, batteri gramnegativi (Enterobacteriaceae). I testi cunfirmanu a prisenza o l'absenza di battìri sopra à i livelli di fondo normale cù risultati in u locu in 20 minuti. I testi sò faciuli à fà, ùn necessitanu micca equipaggiu extra è rilevanu ancu i batteri chì si nascondenu in u biofilm. A precisione hè più grande di 98 per centu se più di 1,000 organismi sò prisenti per striscia di prova in paragunà cù i metudi tradiziunali. I kits sò pensati per serve com'è strumentu di screening per circà "hot spots" chì cuntenenu livelli inaccettabili di contaminazione bacteriana. Perchè sò prezzu, veloce è faciule d'utilizà, pò esse realizatu un monitoraghju è teste più frequenti.
benefici
I saggi di rilevazione di batteri enzimatici anu parechji benefici nantu à a cultura standard, l'analisi ATP è PCR cumprese una velocità più veloce, facilità d'usu, precisione più alta, costu più bassu è a capacità di detect biofilm. L'assai enzimatici furniscenu risultati in pocu menu di 20 minuti da a mostra à u risultatu è i risultati sò dispunibuli in u campu o in u situ perchè ùn anu micca bisognu di i campioni per esse mandati à un laboratoriu. L'analisi di a cultura o di PCR utilizanu equipaghji specializati è tecnichi furmati induve l'analisi ùn sò micca, facendu un strumentu di screening efficace è à pocu costu per i pruduttori di l'alimentariu è i prucessori.
cunchiusioni
L'analisi di cultura attuale, ATP è PCR sò caru, lenti è ingombranti. Utilizà a rilevazione di l'enzimi per identificà i batteri in u campu furnisce un modu precisu, rapidu è pocu costu per screening per livelli periculosi di contaminazione bacteriana. Avè un strumentu di screening low cost significa chì l'utilizatori ponu pruvà più spessu, aumentendu cusì assai a rata di successu di catturà a contaminazione bacteriana prima di truvà u so modu à u cunsumadore.